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技術服務

人體細胞iPSC重編程建系

中盛溯源根據客戶科研需求,提供定制化的體細胞重編程等相關服務(例如遺傳疾病患者hiPSC的定制)。
我們采用非整合重編程技術,從各種人類成體細胞制備科研級hiPSC細胞株。科研級hiPSC細胞株具有與人類胚胎干細胞(hESC)高度類似的克隆形態和基因表達,長期維持正常核型(不包括一些特殊疾病來源的細胞),并在體外(in vitro)和體內(in vivo)都具有完備的三胚層分化潛能。
中盛溯源的人類細胞研發中心按照現行藥品生產管理規范(cGMP)標準建成,包括1000 m2臨床級細胞實驗室(B+A級),1000 m2科研級細胞實驗室(C+A級),220 m2屏障型實驗動物房(C級)和350 m2分子實驗室等研發生產平臺。研發中心配置一系列先進的細胞研發、生產、質檢設備,建立起了一整套標準化質量管理體系。中盛溯源目前已成功制備多株科研級和臨床級hiPSC細胞株(健康型和疾病型),并應用于體外疾病建模、藥物篩選和測試、動物移植實驗等科研領域。
我們以嚴格的質量標準完成制備、鑒定、儲存、包裝、物流等服務環節,滿足客戶的科研要求,保證后續實驗的重復性和可靠性。

項目內容


描述
體細胞來源 推薦外周血作為重編程成體細胞來源,也接受其他組織細胞(如皮膚成纖維細胞)
制備過程 采用非整合重編程方法制備hiPSC細胞株
hiPSC
無外源基因插入
培養條件
重編程及hiPSC培養均在化學成分明確的培養體系中進行,細胞質量穩定,分化潛能完
交付標準 單個供體制備3個hiPSC克隆,每個克隆提供凍存細胞2管(>2×106細胞/管)
交付周期
3-6個月




重編程流程


交付標準


項目 描述
供體樣本傳染病原檢測 AIDS、Syphylis、Hepatitis B、Hepatitis C感染檢測
細胞學檢測 細胞形態、細胞生長情況、細胞數量、細胞活率
細胞表面標志物
SSEA4 / TRA-1-81,流式檢測
內源性多能性基因表達
OCT4 / NANOG,qRT-PCR檢測
無外源基因整合
載體序列PCR檢測
基因組穩定性
染色體核型分析
微生物及內毒素檢測
細菌、真菌、支原體及內毒素檢測
細胞身份驗證
確認來自供體同源組織
細胞分化潛能鑒定
畸胎瘤測試,可檢測到三個胚層分化的組織




1、重編程hiPSC克隆形成圖示

外周血重編程-hiPSC克隆形成階段細胞形態圖示。

中盛溯源在重編程建系上有著豐厚的經驗和技術實力,每次重編程可獲得上百個細胞克隆;

如上圖所示一個視野下擁有10個hiPSC克隆出現,大量的克隆出現保證了重編程的高成功率。標尺:200μm。


2、重編程后hiPSC克隆形態圖示

外周血重編程初始階段及擴增后的hiPSC克隆形態圖示。

圖A、B為重編程初始hiPSC克隆和擴增后的hiPSC克隆標尺:200μm

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