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hiPSC-Luc-GFP細胞株

Rosa26位點是常用的基因敲入位點;敲入該位點的基因表達活性高,對旁側基因影響較小。利用CRISPR基因編輯技術,可將外源的基因片段定點插入到Rosa26位點,實現外源基因的穩定高表達。
Nuwacell? hiPSC-Luc-GFP細胞株是由中盛溯源商品化hiPSC細胞株(RC01001-A)制得,利用CRISPR基因編輯技術,將Luc和GFP等基因片段定點插入到Rosa26位點,細胞可以高效的表達Luciferase和GFP,可在Nuwacell? 科研級hPSC培養體系中可以長期穩定快速增殖,具有與人類胚胎干細胞(hESC)高度類似的克隆形態和基因表達,長期維持正常核型,并在體外(in vitro)和體內(in vivo)都具有完備的三胚層分化潛能。適合科研用途的干細胞研究和應用。

Nuwacell? hiPSC-Luc-GFP細胞株優勢:

穩定性高,后代表達一致

能實現A基因在Rosa26位點及B基因在H11位點同時過表達

外源基因表達不受旁側基因影響,最大程度減少了對內源性基因的影響

產品 規格 產品號 來源
Nuwacell? hiPSC-Luc-GFP細胞株 >2×106
RC01010 男,血液來源

1、細胞敲入基因信息

Nuwacell? 科研級hiPSC-Luc-GFP細胞株Rosa 26 位點敲入基因信息示意圖。




2、細胞形態與生長情況

連續培養的Nuwacell? hiPSC-Luc-GFP細胞株(P30)細胞形態圖示。熒光倒置顯微鏡圖示。
圖A、B為正常傳代DAY 2細胞圖示,C、D為正常傳代DAY 3細胞圖示。標尺:100μm。



3、細胞GFP陽性率檢測

連續培養的Nuwacell? hiPSC-Luc-GFP細胞株(P30)GFP陽性率檢測,GFP表達陽性。
上圖為流式細胞分析結果,淺灰色線條為hiPSC陰性對照;黑線為hiPSC-Luc-GFP細胞株的GFP陽性率結果。

4、細胞熒光素酶(Luciferase)活性檢測

Nuwacell? hiPSC-Luc-GFP細胞株(P30)熒光素酶(Luciferase)活性檢測結果。
上圖為RLU(相對熒光強度)分析結果,其中陰性對照為普通hiPSC,hiPSC-Luc-GFP細胞株(P30)的熒光素酶(Luciferase)報告基因表達陽性。


5、細胞表面標志物檢測

Nuwacell? hiPSC-Luc-GFP細胞株(P30)細胞表面標志物檢測結果。

上圖為流式細胞分析結果,其中淺灰色線條為同種抗體陰性對照,黑線為hiPSC細胞表面標志物抗體。

6、細胞多能基因檢測

Nuwacell? hiPSC-Luc-GFP細胞株(P30)細胞多能基因檢測結果。

上圖為qRT-PCR分析結果,POU5F1與NANOG為細胞多能基因。

7、細胞染色體核型檢測

Nuwacell? hiPSC-Luc-GFP細胞株(P30)細胞核型檢測結果46,XY。

結果解釋:G顯帶,計數20個分裂相,核型分析5個,未發現染色體數目或結構異常。

8、細胞分化潛能檢測

Nuwacell? hiPSC-Luc-GFP細胞株(P30)細胞在免疫缺陷小鼠體內形成畸胎瘤。標尺:100μm

E、F、G分別為神經組織(外胚層)、軟骨組織(中胚層)、腸上皮組織(內胚層),成瘤時間8周。

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